ABSTRACT
Os métodos de laboratório säo ferramentas importantes para se alcançar as principais metas para o controle da malária, que säo: a) Diagnóstico precoce e tratamento rápido; b) métodos preventivos, incluindo o controle do vetor; c) prevencäo e controle de epidemias e d) capacitaçäo de países endêmicos para pesquisa e controle da doença. Estes säo aplicados na prática clínica para o diagnóstico individual e para o seguimento de pacientes sob tratamento específico anti-malárico. Também säo úteis em estudos epidemiológicos, pois permitem medir infecções atuais e passadas da populaçäo, assessorar a suscetibilidade à drogas, avaliar o estado funcional da populaçäo e detectar a presença de infecçäo no mosquito. Para a realizaçäo do diagnóstico precoce na prática clínica deve-se utilizar métodos para detecçäo de plasmódios ou de seus componentes (antígenos ou DNA) em hemácias. Para estudos epidemiológicos, uma maior variedade de métodos podem ser utilizados, pois o tempo näo é crucial, e podem ser feitos em um laboratório central com equipamentos especializados e automatizados. Neste artigo, avaliamos criticamente os métodos de laboratório disponíveis para: a) Detecçäo de Plasmodium em hemácias; b) detecçäo de antígenos de Plasmodium em hemácias e soro; c) detecçäo do DNA de Plasmodium; d) detecçäo de anticorpos anti-Plasmodium; e) avaliar o estado imune e e) detecçäo de esporozoítas no mosquito.
Subject(s)
Humans , Animals , Clinical Laboratory Techniques , Malaria/diagnosis , Malaria/prevention & control , Antibodies, Protozoan/isolation & purification , Antigens, Protozoan/isolation & purification , Malaria, Falciparum/diagnosis , Malaria, Falciparum/parasitology , Malaria, Vivax/diagnosis , Malaria, Vivax/parasitology , Microscopy, Fluorescence , Plasmodium falciparum/isolation & purification , Plasmodium malariae/isolation & purification , Plasmodium vivax/isolation & purification , Sensitivity and SpecificityABSTRACT
O objetivo deste estudo foi padronizar variaveis tecnicas para o armazenamento de Plasmodium falciparum e de seus componentes antigenicos. Sedimentos de parasitas foram obtidos do cultivo in vitro de P. falciparum e estocados em diferentes temperaturas por diferentes periodos de tempo. De cada variavel, foram extraidos os componentes antigenicos com detergente anfotero Zwittergent na presenca e na ausencia de inibidores de protease e submetidos ou nao a posterior dialise. Os produtos foram estocados por 15, 30 e 60 dias em diferentes temperaturas e caracterizados por SDS-PAGE. A atividade antigenica de cada extrato foi determinada por ELISA e Western blotting usando soros positivos e negativos para anticorpos IgG anti-formas eritrocitarias de P. falciparum. Os extratos antigenicos de parasitas estocados ate 10 dias a -20 graus Celsius ou por 2 meses a -70 graus Celsius e tratados com inibidores de protease, sob as diferentes condicoes de armazenamento, apresentaram melhor definicao das bandas proteicas no SDS-PAGE e Western blot e melhores resultados no ELISA, permitindo diferenciacao segura dos soros positivos e negativos